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hIL-2 NPG小鼠

1. 基本信息


品系名称:NOD. Prkdcscid Il2rgtm1 VstTg(Csf1p –IL2)Vst/Vst

常用名:hIL2-NPG /Vst; NPG.hIL-2

背景  :NOD-scid/NcrCrl

毛色:白色

品系建立:将mouse CSF1-promoter与人Interleukn-2(IL-2)基因的CDS序列相连接,构建pcDNA3.1-CSF1P-IL2转基因载体质粒,扩增、抽提、去内毒素后,使用Hind3+Stu1双酶切线性化,回收3.1Kb目的片段进行胚胎显微注射,注射到NPG小鼠受精卵的原核中。在获得的子代中筛选合适表达量的阳性小鼠。在隔离器中,按照转基因阳性鼠配NPG小鼠的方式扩繁,建立商品化hIL2-NPG小鼠品系。


2.hIL-2 NPG表型特征


在NPG小鼠中表达人的IL-2细胞因子。IL-2 是一种介导白细胞之间相互作用的细胞因子,起先被称为T细胞生长因子,可刺激T细胞、NK细胞、B细胞的增殖并加强它们的功能。由于小鼠的IL-2与人的IL-2存在种属差异,而且在NPG这样的免疫缺陷小鼠中IL-2的分泌本来就减弱,所以在造血干细胞移植或免疫细胞移植建立的leyu乐鱼体育app下载官网手机版免疫系统小鼠中缺乏IL-2刺激信号,致使依赖IL-2因子的细胞,尤其是NK细胞的分化发育和功能发挥受到影响。表达人IL-2的NPG小鼠可以促进leyu乐鱼体育app下载官网手机版免疫系统小鼠T细胞、NK细胞的分化发育,增强其功能。

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hIL2-NPG小鼠的外周血中,ELISA检测人IL-2在血清里的含量为40~70pg/ml。

以下是hIL2-NPG小鼠移植脐带血分离的CD34阳性造血干细胞之后主要人源免疫细胞的重建的一个实例。


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▲在hIL2-NPG小鼠上移植CD34+造血干细胞4周后,小鼠外周血中人源CD45阳性细胞的比例可以达到较高水平(均值达40%以上)。在人源CD45阳性细胞中,CD56阳性的NK细胞所占比例较高,并在移植8周之后稳定维持高水平重建。

IL-2除了促进NK细胞的分化发育,对T细胞的发育也有较强的促进作用。但是由于T细胞分化发育较晚,在HSC移植12周时CD3阳性T细胞仍处在较低水平。因此,HSC移植的hIL2-NPG小鼠模型有约两个月的以人源NK细胞为主的窗口期(移植后4-12周)。此模型可以作为体内研究NK功能以及通过NK细胞功能发挥抗肿瘤、抗病毒作用(如ADCC作用)药效评价的理想模型。


除应用于CD34+造血干细胞移植外,hIL2-NPG小鼠也支持从成体PBMC分离的NK细胞的移植。经数据验证,纯化的NK细胞可在此小鼠上稳定维持及增殖。




hIL-2 NPG小鼠核心技术: